HPLC分析，尤其是正相色譜的分析受溫度的影響特別大，反相分析一般受影響不大，有些物質(zhì)的分析必須在固定的溫度下進行。之前用鈣柱做過葡萄糖的分析，要求必須柱溫85度。

　　而在色譜定性方法中，柱溫變化對定性結(jié)果的影響如下：

　　①當(dāng)采用絕對保留值定性時，其他色譜條件不變，柱溫變化時，保留時間就會發(fā)生變化，這樣就直接影響定性結(jié)果判斷。

　　②當(dāng)采用相對保留值α定性時，α只是柱溫和固定液的函數(shù)，只與待測組分的熱力學(xué)性質(zhì)有關(guān)，消除了外界因素的影響，因此跟柱溫變化關(guān)系不大，但是柱溫變化影響判斷結(jié)果。

　　③當(dāng)采用保留指數(shù)定性時，恒溫分析，保留指數(shù)與保留時間有關(guān)，而柱溫影響保留時間變化；程序升溫分析，除了保留時間，保留指數(shù)還與保留溫度有關(guān)。因此，這種定性方法易受柱溫變化影響。

　　④當(dāng)采用純樣疊加法定性時，已知混合物中含某組分，將該組分的純樣加入，觀察加入前后的響應(yīng)信號變化。柱溫變化，保留時間變化，但是加入前后的樣品影響信號變化是一致的，因此柱溫變化不影響采用這種方法定性的結(jié)果。

　　而在定量計算時，經(jīng)常要用到校正因子，如重量校正因子，和組分的質(zhì)量以及響應(yīng)信號有關(guān)。柱溫變化，峰高變化，峰面積不變，因此，在柱溫變化不影響峰形正常的前提下，以峰高為響應(yīng)信號的重量校正因子，受柱溫影響，而以峰面積為響應(yīng)信號的重量校正因子將不受影響。常見定量方法中，在柱溫波動不影響出峰效果的前提下，對定量結(jié)果的影響如下：

　　①采用歸一化法時，定量時需要各組分的校正因子，當(dāng)以峰面積為響應(yīng)信號時，定量結(jié)果不受影響，以峰高為響應(yīng)信號則受影響。

　　②采用內(nèi)標(biāo)法時，需要計算定量校正因子，影響規(guī)律和①同。

　　③采用外標(biāo)法時，即標(biāo)準(zhǔn)曲線法，當(dāng)以峰面積為響應(yīng)信號時，不受影響，但是當(dāng)以峰高為響應(yīng)信號時，影響很大。

　　總之，柱溫變化可能會導(dǎo)致定性、定量分析結(jié)果的變化。